凝膠色譜柱是一種常用的分離技術,廣泛應用于生物學、生物化學、藥學、食品科學等多個領域。它的基本原理是通過凝膠顆粒來實現(xiàn)樣品分離,凝膠顆粒根據(jù)其物理化學性質選擇性地固定不同的化合物,從而實現(xiàn)樣品的分離和純化。
常見的凝膠材料包括聚丙烯酰胺凝膠(Polyacrylamide Gel,簡稱PA)、瓊脂糖凝膠(Agarose Gel)和硅膠凝膠(Silica Gel)。聚丙烯酰胺凝膠主要應用于蛋白質、多肽和核酸的分析和純化,瓊脂糖凝膠主要應用于大分子多糖、DNA片段的分析和純化,硅膠凝膠主要應用于小分子化合物的分析和純化。
凝膠色譜柱的分離機理主要包括凝膠顆粒的吸附和分子篩效應。凝膠顆粒表面的功能基團能夠與化合物發(fā)生作用,形成化學鍵,使其被固定在凝膠上。當樣品通過凝膠色譜柱時,分子會根據(jù)其不同的分子大小、電荷、親疏水性等物理化學性質在凝膠顆粒表面逗留時間不同,從而實現(xiàn)分離和純化。
常見分類:
凝膠色譜柱有不同的形態(tài),包括管柱、板柱和石英管柱等。
管柱是一種常用的凝膠色譜柱,通常是由玻璃或塑料制成的管,內部填充著凝膠。
板柱通常由平板材料制成,是一種較新的型號。
石英管柱則是由石英材料制成的,因其化學和物理性質穩(wěn)定,被廣泛應用于高效液相色譜中。凝膠色譜柱還有不同的填充方式,包括前充式、后充式和包覆式等,不同的填充方式適用于不同的樣品和分析條件。
產品應用:
凝膠色譜柱的應用非常廣泛。在蛋白質分離和純化中,凝膠色譜柱通常作為一種重要的步驟。例如,離子交換柱、尺寸排除柱、親和層析柱和疏水柱等可以在不同的層次上對蛋白質進行分離和純化。
在核酸分析中,瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的技術,可用于分離不同長度的DNA片段。在藥學中,凝膠色譜柱也被廣泛應用于藥物分析和檢測,包括毒物檢測、藥物代謝動力學和藥典標準化等。
產品特點:
(1)Supdex:高分辨率凝膠過濾層析,精細純化
Supdex30pg、Supdex75pg、Supdex 200 pg為新一代凝膠過濾介質,由葡聚糖與高交聯(lián)度瓊脂糖共價 結合而成,高交聯(lián)度瓊脂糖賦予了介質較高的耐壓性,介質中分布的葡聚糖實現(xiàn)了其對不同大小蛋白和多肽的高度分離,能夠實現(xiàn)高流速下高分辨率的精細分離純化實驗。
(2)Pharose Fast Flow:大分子凝膠過濾
Pharose系列生物分子純化介質是基于高交聯(lián)瓊脂糖微球開發(fā)的傳統(tǒng)生物分離介質,該產品保留了天然多糖 化合物**的親水性及大網架結構,與生物活性大分子有很好的相容性,具有高載量,高適用性,無非特異性吸 附,快流速操作等特點,廣泛用于病毒、蛋白質、核酸、多肽及多糖等的生物大分子實驗室規(guī)模制備和生物制 藥、生物工程的大工業(yè)化制備。
(3)Bedex:經濟快速脫鹽/置換溶液
Bedex系列是基于交聯(lián)葡聚糖微球開發(fā)的凝膠過濾介質,該產品具有良好的化學穩(wěn)定性和較高的分辨率,具 有多種分離范圍和顆粒大小可供選擇,廣泛用于蛋白質的分離和蛋白質的脫鹽/置換溶液。
使用和維護:
凝膠色譜柱的使用和維護也十分重要,以下是幾點使用凝膠色譜柱的建議:
1. 在使用之前,首先應當充分平衡凝膠顆粒,即將緩沖液流經凝膠時,緩沖液的pH值和離子強度可以隨時間穩(wěn)定下來。
2. 樣品中出現(xiàn)沉淀物時,應當采用化學清洗方法,而不是物理清洗方法,以避免柱體受損。
3. 在保養(yǎng)凝膠色譜柱時,應當保證柱體充分干燥,并存儲在合適的溫度和濕度條件下,以保證其長期可靠使用。
凝膠色譜柱是一種構建于化學、物理和生物學基礎之上的高效分離和純化技術。隨著分析和純化技術的不斷發(fā)展和完善,它在科學研究和產業(yè)應用中的地位和作用也將不斷得到提高。
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