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簡(jiǎn)要描述:Vydac® MS色譜柱(300Å硅膠填料、高分辨率、高回收率)1:*的選擇性可以幫助發(fā)現(xiàn)其它C18 柱可能未分辨出的峰2: 極低TFA 濃度或甚至無(wú)TFA 仍可得到對(duì)稱性良好的峰形3:備有小口徑與毛細(xì)管口徑規(guī)格的色譜柱可用于液相質(zhì)譜分析4:對(duì)蛋白質(zhì)的高回收率有利于放大制備
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Vydac® MS色譜柱*的選擇性
某牛胎球蛋白(bovine fetuin)樣品,分子量約36KDa 的糖蛋白,經(jīng)胰蛋白酶酶解后用HPLC 分析。在對(duì)比柱1 和2 上,一些樣品組分會(huì)干擾肽的分離,表現(xiàn)為色譜“鼓包”上疊加峰。而Vydac® MS色譜柱*的選擇性避免了這種分離問(wèn)題。
Vydac® MS色譜柱無(wú)以倫比的分離度與峰對(duì)稱性
Vydac® MS C4 色譜柱為人生長(zhǎng)因子(hGH)及其去酰胺降解物(desamidohGH)的分析提供了的分析效果。而對(duì)比柱顯示出其固定相對(duì)hGH過(guò)強(qiáng)的保留作用,分析效果不理想。
Vydac® MS色譜柱使用極少或甚至不使用TFA 而仍然可得*的峰形
反相分析蛋白和肽的常規(guī)經(jīng)驗(yàn)是使用酸性流動(dòng)相如在流動(dòng)相中添加TFA。TFA 能夠掩蓋被測(cè)物的堿基,減少混合模式的保留,從而改善峰形。TFA 還能改變對(duì)于不同被測(cè)物的保留與選擇性,調(diào)節(jié)TFA濃度能夠優(yōu)化分離效果。但是TFA 能吸收紫外,因此在低紫外波長(zhǎng)下會(huì)增加背景值。而且TFA 對(duì)于電噴霧質(zhì)譜檢測(cè)特別不利,它會(huì)干擾電噴霧過(guò)程中的離子生成,即所謂的“淬滅”效應(yīng),從而導(dǎo)致質(zhì)譜檢測(cè)的靈敏性下降。
對(duì)疏水性蛋白質(zhì)的分析
跨膜蛋白(transmembrane proteins)是吸附在生物膜上的疏水性蛋白質(zhì),特別難以分離。Vydac MS 色譜柱為這類(lèi)生物分子提供了*的選擇性與峰形。在這個(gè)例子里,一個(gè)疏水性的跨膜蛋白得以與一個(gè)合成的豆蔻酰衍生物和其它細(xì)胞組分分離。
高蛋白回收率有利于高靈敏度的分析
*的填料表面化學(xué)處理技術(shù)減少了填料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附,從而可以得到更高的回收率,表現(xiàn)為同樣上樣量下得到更高的色譜峰、即更靈敏的檢測(cè)。而對(duì)于制備色譜而言,更高的回收率特別有利于產(chǎn)量/生產(chǎn)效益的提高,死吸附的減少還有利于在一次運(yùn)行中上載更大的上樣量。下圖表現(xiàn)了在低蛋白上樣量下,Vydac® MS C4 與其它兩個(gè) 對(duì)比C4 柱所得的百分回收率。
常用Vydac® MS分析色譜柱及保護(hù)柱貨號(hào)快速獲取表:
【有更多規(guī)格此處未列出。如需其它規(guī)格,如不同粒徑、鍵和相、柱內(nèi)徑或柱長(zhǎng)度,請(qǐng)垂詢上海宸喬生物科技有限公司】
填料(粒徑) | 色譜柱 | 推薦的柱保護(hù) | |||
柱內(nèi)徑 | 柱長(zhǎng)150mm | 柱長(zhǎng)250mm | 套裝: 1 卡套 + 1 柱芯 | 套裝:2 柱芯 | |
214MS (C4), 5μm | 1.0mm | 214MS5115 | 214MS51 | 214GK51MS | 214GD51MS |
2.1mm | 214MS5215 | 214MS52 | 214GK52MS | 214GD52MS | |
4.6mm | 214MS5415 | 214MS54 | 214GK54MS | 214GD54MS | |
208MS (C8), 5μm | 1.0mm | 208MS5115 | 208MS51 | 208GK51MS | 208GD51MS |
2.1mm | 208MS5215 | 208MS52 | 208GK52MS | 208GD52MS | |
4.6mm | 208MS5415 | 208MS54 | 208GK54MS | 208GD54MS | |
218MS (C18,聚合式), 5μm | 1.0mm | 218MS5115 | 218MS51 | 218GK51MS | 218GD51MS |
2.1mm | 218MS5215 | 218MS52 | 218GK52MS | 218GD52MS | |
4.6mm | 218MS5415 | 218MS54 | 218GK54MS | 218GD54MS | |
238MS (C18,單點(diǎn)式), 5μm | 1.0mm | 238MS5115 | 238MS51 | 238GK51MS | 238GD51MS |
2.1mm | 238MS5215 | 238MS52 | 238GK52MS | 238GD52MS | |
4.6mm | 238MS5415 | 238MS54 | 238GK54MS | 238GD54MS | |
219MS (Diphenyl), 5μm | 1.0mm | 219MS5115 | 219MS51 | 219GK51MS | 219GD51MS |
2.1mm | 219MS5215 | 219MS52 | 219GK52MS | 219GD52MS | |
4.6mm | 219MS5415 | 219MS54 | 219GK54MS | 219GD54MS |
Vydac® MS毛細(xì)管色譜柱貨號(hào)一覽表:
【毛細(xì)管柱保護(hù)柱或樣品富集柱此處未列出。如有需要,請(qǐng)垂詢上海宸喬生物科技有限公司】
填料(粒徑) | 柱內(nèi)徑 | 柱長(zhǎng):50mm | 柱長(zhǎng):100mm | 柱長(zhǎng):150mm | 柱長(zhǎng):250mm |
214MS (C4), 5μm | 75um | 214MS5.07505 | 214MS5.07510 | 214MS5.07515 | 214MS5.07525 |
150um | 214MS5.1505 | 214MS5.1510 | 214MS5.1515 | 214MS5.1525 | |
300um | 214MS5.305 | 214MS5.310 | 214MS5.315 | 214MS5.325 | |
500um | 214MS5.505 | 214MS5.510 | 214MS5.515 | 214MS5.525 | |
208MS (C8), 5μm | 75um | 208MS5.07505 | 208MS5.07510 | 208MS5.07515 | 208MS5.07525 |
150um | 208MS5.1505 | 208MS5.1510 | 208MS5.1515 | 208MS5.1525 | |
300um | 208MS5.305 | 208MS5.310 | 208MS5.315 | 208MS5.325 | |
500um | 208MS5.505 | 208MS5.510 | 208MS5.515 | 208MS5.525 | |
218MS (C18,聚合式),3μm | 75um | 218MS3.07505 | 218MS3.07510 | 218MS3.07515 | 218MS3.07525 |
150um | 218MS3.1505 | 218MS3.1510 | 218MS3.1515 | 218MS3.1525 | |
300um | 218MS3.305 | 218MS3.310 | 218MS3.315 | 218MS3.325 | |
500um | 218MS3.505 | 218MS3.510 | 218MS3.515 | 218MS3.525 | |
218MS (C18,聚合式),5μm | 75um | 218MS5.07505 | 218MS5.07510 | 218MS5.07515 | 218MS5.07525 |
150um | 218MS5.1505 | 218MS5.1510 | 218MS5.1515 | 218MS5.1525 | |
300um | 218MS5.305 | 218MS5.310 | 218MS5.315 | 218MS5.325 | |
500um | 218MS5.505 | 218MS5.510 | 218MS5.515 | 218MS5.525 | |
238MS (C18,單點(diǎn)式),5μm | 75um | 238MS5.07505 | 238MS5.07510 | 238MS5.07515 | 238MS5.07525 |
150um | 238MS5.1505 | 238MS5.1510 | 238MS5.1515 | 238MS5.1525 | |
300um | 238MS5.305 | 238MS5.310 | 238MS5.315 | 238MS5.325 | |
500um | 238MS5.505 | 238MS5.510 | 238MS5.515 | 238MS5.525 | |
219MS (Diphenyl), 5μm | 75um | 219MS5.07505 | 219MS5.07510 | 219MS5.07515 | 219MS5.07525 |
150um | 219MS5.1505 | 219MS5.1510 | 219MS5.1515 | 219MS5.1525 | |
300um | 219MS5.305 | 219MS5.310 | 219MS5.315 | 219MS5.325 | |
500um | 219MS5.505 | 219MS5.510 | 219MS5.515 | 219MS5.525 |
Vydac® MS半制備及制備色譜柱貨號(hào)一覽表:
【半制備保護(hù)柱此處未列出。如有需要,請(qǐng)垂詢上海宸喬生物科技有限公司】
填料(粒徑) | 柱規(guī)格:內(nèi)徑 x 柱長(zhǎng) | ||||
4.6 x 250mm | 10 x 150mm | 10 x 250mm | 22 x 50mm | 22 x 100mm | |
214MS (C4), 5μm | 214MS54 | 214MS51015 | 214MS510 | 214MS52205 | 214MS52210 |
208MS (C8), 5μm | 208MS54 | 208MS51015 | 208MS510 | 208MS52205 | 208MS52210 |
218MS (C18), 5μm | 218MS54 | 218MS51015 | 218MS510 | 218MS52205 | 218MS52210 |
規(guī)格:內(nèi)徑 x 柱長(zhǎng) | 填料(粒徑) | |||||
214MS (C4) | 208MS (C8) | 218MS (C18) | ||||
10μm | 15μm | 10μm | 15μm | 10μm | 15μm | |
4.6 x 250mm | 214MS104 | 214MS154 | 208MS104 | 208MS154 | 218MS104 | 218MS154 |
10 x 150mm | 214MS101015 | 214MS151015 | 208MS101015 | 208MS151015 | 218MS101015 | 218MS151015 |
10 x 250mm | 214MS1010 | 214MS1510 | 208MS1010 | 208MS1510 | 218MS1010 | 218MS1510 |
22 x 150mm | 214MS102215 | 214MS152215 | 208MS102215 | 208MS152215 | 218MS102215 | 218MS152215 |
22 x 250mm | 214MS1022 | 214MS1522 | 208MS1022 | 208MS1522 | 218MS1022 | 218MS1522 |
30 x 150mm | 214MS103015 | 214MS153015 | 208MS103015 | 208MS153015 | 218MS103015 | 218MS153015 |
30 x 250mm | 214MS1030 | 214MS1530 | 208MS1030 | 208MS1530 | 218MS1030 | 218MS1530 |
50 x 150mm | 214MS155015 | 208MS155015 | 218MS155015 | |||
50 x 250mm | 214MS1550 | 208MS1550 | 218MS1550 | |||
100 x 150mm | 214MS1510015 | 208MS1510015 | 218MS1510015 | |||
100 x 250mm | 214MS15100 | 208MS15100 | 218MS15100 |
對(duì)蛋白質(zhì)的回收率比較:Vydac MS vs. 行業(yè)產(chǎn)品在常規(guī)水/乙腈/0.1%TFA 梯度洗脫條件下,在 C4 和C18 柱上用三種蛋白質(zhì)的三個(gè)上樣量,分別考察Vydac MS 與另一
行業(yè)產(chǎn)品的回收率情況。以MS 超出的回收率百分比為縱坐標(biāo)表征(縱坐標(biāo)數(shù)值計(jì)算公式:Y=(MS 峰面積積分—對(duì)比柱峰面積積分)/對(duì)比柱面積積分x 100%),發(fā)現(xiàn):MS C18在低上樣量時(shí)回收率高出41%、在高上樣量下回收率高出29%;MS C4 在低上樣量下回收率高出57%、在高上樣量下回收率高出12%。
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